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一种具有抗菌活性的水蛭多肽锌螯合物的制备方法
无权-驳回

Preparation method for whitmania pigra Whitman polypeptide zinc chelate possessing antibacterial activity

申请号:201510789034.8 申请日:2015-11-17
摘要:本发明公开了一种具有抗菌活性的宽体金线蛭源多肽锌螯合物的制备方法,该方法的主要步骤包括:(1)宽体金线蛭组织脱脂(2)宽体金线蛭源蛋白的酶解;(3)宽体金线蛭多肽分离;(4)宽体金线蛭酶解多肽与七水合硫酸锌的螯合反应;(5)螯合反应产物的醇沉分离和洗涤。本发明制得的水蛭多肽锌螯合物具有较高的得率和螯合率,通过牛津杯法抑菌检测试验证明其对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌具有明显的抗菌生物活性,在食品、医药领域具有巨大的应用前景。
Abstract: The invention discloses a preparation method for a whitmania pigra Whitman polypeptide zinc chelate possessing antibacterial activity. The method comprises the following main steps: (1) degreasing whitmania pigra Whitman tissue; (2) performing enzymolysis on whitmania pigra Whitman protein; (3) separating whitmania pigra Whitman polypeptide; (4) performing chelation reaction on whitmania pigra Whitman polypeptide subjected to enzymolysis and zinc sulfate heptahydrate; and (5) performing alcohol precipitation separating and washing on the chelation reaction product. The prepared whitmania pigra Whitman polypeptide zinc chelate possesses relatively high yield and chelation rate, and oxford-cup-method bacteriostasis detection test proves that the whitmania pigra Whitman polypeptide zinc chelate possesses obvious antibiosis biological activity on escherichia coli and bacillus subtilis, and possesses great application prospect in the field of food and medicines.
申请人: 常熟理工学院
Applicant: CHANGSHU INST TECHNOLOGY
地址: 215500 江苏省苏州市常熟市南三环路99号
发明(设计)人: 韩曜平 曾庆瑞 朱敏佳 王梦璠 徐盛金 狄鹏程 周宇 钱文举 陈媛媛 丁磊 胡沁莹 李嘉 徐奕
Inventor: HAN YAOPING; ZENG QINGRUI; ZHU MINJIA; WANG MENGFAN; XU SHENGJIN; DI PENGCHENG; ZHOU YU; QIAN WENJU; CHEN YUANYUAN; DING LEI; HU QINYING; LI JIA; XU YI
主分类号: C12P21/06(2006.01)I
分类号: C12P21/06(2006.01)I C07K1/36(2006.01)I C07K1/30(2006.01)I C07K1/20(2006.01)I
  • 法律状态
2020-02-04  发明专利申请公布后的驳回IPC(主分类):C12P 21/06申请公布日:20160224
2016-03-23  实质审查的生效IPC(主分类):C12P 21/06申请日:20151117
2016-02-24  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  一种具有抗菌活性的水蛭多肽锌螯合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1)宽体金线蛭组织脱脂:将宽体金线蛭冻死后匀浆,匀浆液中加入脱脂剂,在常温下脱脂12~24h,脱脂液离心,将沉淀冷冻干燥得到脱脂产物;2)宽体金线蛭源蛋白的酶解:将脱脂产物与去离子水按1:10~1:20(w/v)混合,加入复合酶或单一酶进行催化水解反应,反应液离心后保留上清液,冷冻干燥,制得宽体金线蛭多肽冻干粉粗品;3)宽体金线蛭多肽分离纯化:将宽体金线蛭多肽冻干粉粗品溶于去离子水,配制多肽浓度为10mg/ml的样品溶液,将5ml样品上凝胶层析柱分离,用去离子水洗脱,通过层析柱蛋白质分子量标准曲线测算各组分分子量,将分子量小于10KD的组分合并后冷冻干燥,经过多次分离,获得足量分子量小于10KD的多肽冻干粉;4)宽体金线蛭酶解多肽与七水合硫酸锌的螯合反应:将分离后的分子量小于10KD的多肽冻干粉全部溶于去离子水中得到多肽溶液,加入七水合硫酸锌,在恒温磁力搅拌水浴中进行螯合反应;5)螯合反应产物的醇沉分离和洗涤:将步骤4)所得的螯合反应液用体积分数为70%~90%乙醇溶液反复洗涤、离心数次保留沉淀,在离心上清液中加入5~8滴0.2%双硫腙?氯仿试液,待上清液无颜色反应后,将所得沉淀物冷冻干燥,制得宽体金线蛭多肽锌螯合物。
公开号  105349601A
公开日  2016-02-24
专利代理机构  南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204
代理人  王艳
颁证日  
优先权  
 
国别 优先权号 优先权日 类型
CN  201510789034  20151117 
国际申请  
国际公布  
进入国家日期  
  • 专利对比文献
类型 阶段 文献号 公开日期 涉及权利要求项 相关页数
SEA  US4832849A  19890523  1-7  全文 
SEA  CN102603881A  20120725  1-7  全文 
SEA  CN102669401A  20120919  1-7  全文 
SEA  CN104004087A  20140827  1-7  权利要求1-2 
注:不保证该信息的有效性、完整性、准确性,以上信息也不具有任何效力,仅供参考。使用前请另行委托专业机构进一步查核,使用该信息的一切后果由用户自行负责。
X:单独影响权利要求的新颖性或创造性的文件;
Y:与检索报告中其他 Y类文件组合后影响权利要求的创造性的文件;
A:背景技术文件,即反映权利要求的部分技术特征或者有关的现有技术的文件;
R:任何单位或个人在申请日向专利局提交的、属于同样的发明创造的专利或专利申请文件;
P:中间文件,其公开日在申请的申请日与所要求的优先权日之间的文件,或会导致需核实该申请优先权的文件;
E:单独影响权利要求新颖性的抵触申请文件。
  • 期刊对比文献
类型 阶段 期刊文摘名称 作者 标题 涉及权利要求项 相关页数
SEA  《Food Research International》  Liangping Jiang,et al.  Preparation and identification of peptides and their zinc complexes with antimicrobial activities from silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) protein hydrolysates  1-7  摘要,第92-97页2.4,2.6-2.8,3.1-3.3 
LIANGPING JIANG,ET AL.: "Preparation and identification of peptides and their zinc complexes with antimicrobial activities from silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) protein hydrolysates", 《FOOD RESEARCH INTERNATIONAL》 
SEA  《食品科技》  姜良萍等  鲢鱼源多肽锌的制备工艺对其抑菌活性的影响  1-7  第125-130页全部 
姜良萍等: "鲢鱼源多肽锌的制备工艺对其抑菌活性的影响", 《食品科技》 
  • 书籍对比文献
类型 阶段 书名 作者 标题 涉及权利要求项 相关页数
  • 附加信息
同族专利
 
引用文献
US4832849ACN102603881ACN102669401A
CN104004087A
 
被引用文献
CN106072081ACN106072662A