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同种异体皮肤细胞的培养方法
无权-视为撤回

申请号:93101655.X 申请日:1993-02-22
摘要:本发明涉及一种人体皮肤细胞的培养方法,为解 决皮源少等问题而研制。该方法是先取少量皮肤组 织制成皮片,处理并冲洗至无油滴。将皮片置入皮细 胞消化液中冷消化,分离出表皮细胞和真皮成纤维细 胞,再分别置入涂有鼠尾胶源的培养瓶中,加足由 DMEM、FCS、胰岛素、氢化可的松、青链霉素及两性 霉素混合配制的培养液,分别在37℃、5%CO2环境 中培养。处于增殖高峰的表皮细胞和真皮成纤维细 胞可分期进行同种异体创面移植。
申请人: 北京邮电医院
地址: 100032北京市西城区二龙路
发明(设计)人: 岳毅 王彧
主分类号: C12N5/08
分类号: C12N5/08 C12N5/02 C12N1/02
  • 法律状态
1999-06-02  
1993-07-28  公开
1993-07-21  
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  1、一种同种异体皮肤的培养方法,其特征在于是采用下列操作: 1)取健康者皮肤组织,剪除皮下脂肪,制成中厚皮片,用加入青霉素100万单位,链霉素100μg/ml及两性霉素0.25μg/ml的D-hank′s洗液充分冲洗至无油滴; 2)取0.02%EDTA和0.25%胰蛋白酶,按1∶1体积比混合,按比例注入青霉素100万单位/ml,链霉素100μg/ml及两性霉素0.25μg/ml,配制成皮细胞消化液,将处理好的皮片置入皮细胞消化液中,在4℃环境中冷消化12~18小时,分离出表皮组织和真皮组织,再次分别进行30~60分钟消化,分离出表皮细胞和真皮成纤维细胞; 3)将帮助细胞贴壁的鼠尾胶源铺满培养瓶底,瓶口用氨水棉球塞堵,在鼠尾胶源凝固后用注入青霉素100万单位/ml,链霉素100μg/ml及两性霉素0.25μg/ml的D-hank′s洗液清洗干净; 4)按4∶1体积比混合DMEM培养基和小牛血清FCS,按比例加入胰岛素5μg/ml,氢化可的松0.5μg/ml,青霉素100万单位/ml,链霉素100μg/ml及两性霉素0.25μg/ml配制成复合培养液,将分离好的表皮细胞和真皮成纤维细胞分别置入上述培养瓶中,加足复合培养液,在37℃,5%二氧化碳培养箱内分别培养表皮细胞和真皮成纤维细胞。
公开号  1074708A
公开日  1993-07-28
专利代理机构  邮电部专利服务中心
代理人  王丽琴
颁证日  
优先权  
国际申请  
国际公布  
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