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基于细胞的高通量适体筛选
审中-实审

HIGH THROUGHPUT CELL-BASED SCREENING FOR APTAMERS

申请号:201780061565.2 申请日:2017-08-03
摘要:本发明提供用以使用用于调控报道基因的表达的多核苷酸盒来鉴定特异性结合配体的适体或特异性结合适体的配体的基于真核细胞的筛选方法,其中所述多核苷酸盒含有在5′内含子‑选择性外显子‑3′内含子的情形下的核糖开关。所述核糖开关包含效应子区和适体以使当所述适体结合配体时,发生报道基因表达。
Abstract: The invention provides eukaryotic cell-based screening methods to identify an aptamer that specifically binds a ligand, or a ligand that specifically binds an aptamer, using a polynucleotide cassettefor the regulation of the expression of a reporter gene where the polynucleotide cassette contains a riboswitch in the context of a 5' intron-alternative exon-3' intron. The riboswitch comprises an effector region and an aptamer such that when the aptamer binds a ligand, reporter gene expression occurs.
申请人: 梅里特斯英国第二有限公司
Applicant: MEIRAGTX UK II LTD
地址: 英国伦敦
发明(设计)人: 郭雪翠 冯磊 A.福布斯
Inventor: GUO XUECUI; FENG LEI; FORBES ALEXANDRIA
主分类号: C12Q1/68(2018.01)I
分类号: C12Q1/68(2018.01)I C12N15/10(2006.01)I C12N15/115(2010.01)I C12N15/113(2010.01)I
  • 法律状态
2019-09-27  实质审查的生效IPC(主分类):C12Q 1/68申请日:20170803
2019-09-03  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  1.一种用于选择在真核细胞中结合配体的适体的方法,其包括以下步骤:(a)提供适体文库,(b)将所述适体文库的成员引入用于达成配体介导的报道基因表达的多核苷酸盒中以创建核糖开关文库,(c)将所述核糖开关文库引入真核细胞中,以及(d)使所述真核细胞与配体接触,以及(e)测量所述报道基因的表达,其中所述多核苷酸盒包含侧接5′内含子和3′内含子的选择性剪接外显子,以及核糖开关,所述核糖开关包含(i)效应子区,其包含包括所述3′内含子的5′剪接位点的茎,和(ii)适体,其中所述选择性剪接外显子包含当所述选择性剪接外显子被剪接至报道基因mRNA中时与所述报道基因符合读框的终止密码子。
公开号  110199030A
公开日  2019-09-03
专利代理机构  中国专利代理(香港)有限公司 72001
代理人  罗文锋 李志强
颁证日  
优先权  2016.08.03 US 62/370599
 
国别 优先权号 优先权日 类型
US  62/370599  20160803 
WO  PCT/IB2017/001113  20170803  PCT application claimed as a regional filing N 
国际申请  2017-08-03 PCT/IB2017/001113
国际公布  2018-02-08 WO2018/025085 EN
进入国家日期  2019.04.03
  • 专利对比文献
类型 阶段 文献号 公开日期 涉及权利要求项 相关页数
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