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一种荧光定量PCR技术筛选耐渍涝花生品种或植株的方法
审中-实审

申请号:201510869503.7 申请日:2015-12-02
摘要:本发明公开了一种荧光定量PCR技术筛选耐渍涝花生品种或植株的方法,其包括培养花生幼苗、胁迫处理与样品采集、花生AhGLB序列的应用、筛选等步骤。本发明方法操作简便,不需要模拟自然渍涝条件和各种农艺性状及生理生化指标的检测,周期短,成本低,科学准确,通用性好。
申请人: 山东省花生研究所
地址: 266000 山东省青岛市李沧区万年泉路126号
发明(设计)人: 李春娟 张廷婷 单世华 李林 周西
主分类号: C12Q1/68(2006.01)I
分类号: C12Q1/68(2006.01)I
  • 法律状态
2016-02-17  实质审查的生效IPC(主分类):C12Q 1/68申请日:20151202
2016-01-20  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  一种荧光定量PCR技术筛选耐渍涝花生品种或植株的方法,其特征在于,包括如下步骤:1)培养花生幼苗:选取生长力旺盛的花生种子,用质量分数为65%?85%的乙醇消毒1?5分钟后用质量分数0.1%的HgCl2溶液消毒5?15分钟,再用无菌dH2O冲洗3?4次,置于带有双层滤纸的培养皿中,每个培养皿加dH2O?20?50mL,花生种子5?15粒,25℃人工气候箱中暗培养20?30h后,设置光照强度1000?2000LX,每天光照培养12?16h,培养72h;2)胁迫处理与样品采集:花生幼苗培养10?20天后分为两组,其中一组进行通气处理的为对照组,另一组进行低氧胁迫处理20?30h,分别提取对照组与低氧胁迫处理组花生幼苗根的RNA,反转录为cDNA,置于?80??70℃冰箱中保存备用;3)花生AhGLB序列的应用:对基因进行引物设计,以恒定表达基因Actin作为内参基因对同一样品cDNA模板利用荧光定量PCR仪进行定量分析,引物设计如下:AhGLB?F:5’?TGGAGGCAACAGCATTCACT?3’;AhGLB?R:5’?ATGCTTCCTTCATGGCTGGT?3’;Actin?F:5’?GTCCATCAGGCAACTCGTAGC?3’;Actin?R:5’?GCCCTCGACTATGAGCAAGAG?3’;使用荧光定量PCR仪进行检测,结束后利荧光定量PCR仪自带的SDS?2.0版软件进行结果分析;4)筛选分析。
公开号  105256066A
公开日  2016-01-20
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