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基于组合合成技术合成可控的人源化抗体库的方法与应用
审中-实审
著录变更

申请号:201510829555.1 申请日:2015-11-25
摘要:本发明涉及合成氨基酸变化可控的人源化抗体库的方法,包括:按照DNA固相亚磷酰胺三酯法,合成3′端的一段序列,直至产生氨基酸变化位点;将中间产物全部收集起来;根据设计的序列要求混合,按比例分组,达到变化数量的可控性;再继续合成相应的密码子碱基序列直至下一个氨基酸变化位点;收集中间产物,重新混合均匀,直至产生氨基酸变化位点;根据设计的序列要求,按照上述步骤完成待合成DNA序列和5′端全长序列的合成;重复1-3的步骤产生氨基酸任意位点的任意变化和任意变化的数量的可能性。本发明的方法可控性更强,灵活性高,无突变,合成的人源化抗体库的库容量大。
申请人: 苏州泓迅生物科技有限公司
地址: 215123 江苏省苏州市工业园区星湖街218号生物纳米园C20栋1楼
发明(设计)人: 齐金才 刁文一 柳伟强 黄明霞 杨平
主分类号: C40B50/06(2006.01)I
分类号: C40B50/06(2006.01)I C12N15/13(2006.01)I C12N15/63(2006.01)I C07K16/00(2006.01)I
  • 法律状态
2017-05-31  著录事项变更 IPC(主分类):C40B 50/06变更事项:申请人变更前:苏州泓迅生物科技有限公司变更后:苏州泓迅生物科技股份有限公司变更事项:地址变更前:215123 江苏省苏州市工业园区星湖街218号生物纳米园C20栋1楼变更后:215123 江苏苏州市工业园区星湖街218号生物纳米园C20栋101单元
2016-02-24  实质审查的生效IPC(主分类):C40B 50/06申请日:20151125
2016-01-27  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  一种基于组合合成技术合成可控的人源化抗体库的方法,其包括以下步骤:第一步:设计人源化抗体库:在预构建的人源化抗体库中的合成序列中,在任意位置或者任意比例引入氨基酸;第二步:组合合成随机引物库:在氨基酸变化区域,根据反向中心法则和DNA编码规则,设计对应的DNA序列,通过DNA固相亚磷酰胺三酯法合成随机的引物库;第三步:构建人源化重组抗体库:在扩增体系中加入第二步中获得的引物库中的引物,进行扩增,扩增产物进行酶切后连入载体,获得人源化重组抗体库;其特征在于,第二步中所述的组合合成随机引物库,包括以下几步:(1)按照DNA固相亚磷酰胺三酯法,合成3′端的一段序列,直至产生氨基酸变化位点;(2)将(1)中合成的中间产物全部收集起来;(3)根据设计的序列要求混合,按比例分组,从而达到变化数量的可控性;(4)再继续合成相应的密码子碱基序列直至下一个氨基酸变化位点;(5)根据氨基酸变化位点按照(2)?(4)中的收集、混合分组、合成方法完成所有氨基酸变化位点;(6)收集(5)中合成的中间产物后无需分组,直接合成5’端一段非氨基酸序列;根据设计的序列要求,按照所述(1)?(6)的方法完成待合成DNA序列和5′端全长序列的合成。
公开号  105274630A
公开日  2016-01-27
专利代理机构  苏州慧通知识产权代理事务所(普通合伙) 32239
代理人  黄建月
颁证日  
优先权  
国际申请  
国际公布  
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