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一种用于检测线粒体tRNALeu(UUR)3253T>C突变的试剂盒及其检测方法
审中-实审

申请号:201510812025.6 申请日:2015-11-20
摘要:一种用于检测线粒体tRNALeu(UUR)3253T>C突变的试剂盒及其检测方法。所述方法包括DNA的提取、特异性引物设计、特异性条带PCR扩增、专一性限制性内切酶BstEII酶切、琼脂糖凝胶电泳鉴定等。本发明实现了几小时内出结果,且一种酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列,结果准确。本发明还提供检测原发性高血压相关的线粒体tRNALeu(UUR)3253T>C突变检测试剂盒。检测所需仪器要求低、所需试剂成本小、所需操作简单易掌握、所用方法稳定,特异性好等优点。
申请人: 温州迈拓生物科技有限公司
地址: 325000 浙江省温州市瓯海经济开发区东方南路38号
发明(设计)人: 管敏鑫 薛凌 郑斌娇 唐霄雯 林枝
主分类号: C12Q1/68(2006.01)I
分类号: C12Q1/68(2006.01)I
  • 法律状态
2016-02-24  实质审查的生效IPC(主分类):C12Q 1/68申请日:20151120
2016-01-27  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  一种用于检测线粒体tRNALeu(UUR)3253T>C突变的方法,其特征在于,所述的方法包括以下步骤:(1)提取全基因组DNA:运用蛋白酶K消化裂解蛋白质,酚?氯仿?异戊醇法,提取全基因组DNA;(2)特异性PCR扩增及酶切:根据人类线粒体基因剑桥参考序列特异性设计一对引物3253F、3253R,该引物特异性的扩增含有3253位点的序列,然后利用专一性限制性内切酶BstEII特异性的识别GGTNACC回文结构,3253位点碱基突变后,产生限制性内切酶BstEII识别的回文结构,利用限制性内切酶BstEII识别的专一性,对样本的全基因组DNA进行PCR扩增和酶切;(3)将酶切后的产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据酶切后产生的DNA片段大小不同,检测线粒体tRNALeu(UUR)基因3253位点是否发生突变。
公开号  105274242A
公开日  2016-01-27
专利代理机构  温州金瓯专利事务所(普通合伙) 33237
代理人  黄肇平
颁证日  
优先权  
国际申请  
国际公布  
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