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家蝇胚胎细胞构建抗菌肽attacin真核表达系统所表达的产物及构建方法
审中-实审

申请号:201510533418.3 申请日:2015-08-27
摘要:本发明涉及一种家蝇胚胎细胞构建抗菌肽attacin真核表达系统所表达的产物及构建方法。以家蝇抗菌肽attacin为目标基因,重组杆状病毒Bacmid-pFastBacTM-attacin转染建立的家蝇胚胎细胞系MDEC-07114,构建抗菌肽attacin的家蝇胚胎细胞真核表达系统。全基因合成家蝇抗菌肽attacin,将目的基因attacin克隆入PUC57质粒,重组质粒经双酶切后连接到pFastBacTMHTA供体质粒,重组杆状病毒Bacmid?DNA;重组杆状病毒Bacmid?DNA转染家蝇胚胎细胞MDEC-07114中,提取培养上清和细胞裂解物粗蛋白,经镍柱纯化,SDS-PAGE和Western-Blot对蛋白表达进行检测、鉴定,对表达产物进行抗菌活性检测。
申请人: 遵义医学院
地址: 563000 贵州省遵义市大连路201号
发明(设计)人: 刘晖 贺莉芳 王灵军 王鑫
主分类号: C12N15/866(2006.01)I
分类号: C12N15/866(2006.01)I C07K14/435(2006.01)I A61P31/04(2006.01)I
  • 法律状态
2016-02-24  实质审查的生效IPC(主分类):C12N 15/866申请日:20150827
2016-01-27  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  家蝇胚胎细胞MDEC?07114构建抗菌肽attacin的杆状病毒真核表达系统表达产物及构建方法抗菌肽attacin通过构建的重组杆状病毒(Bacmid?pFastBacTM?attacin)在自建家蝇胚胎细胞MDEC?07114中得到表达,由于该家蝇胚胎细胞为本发明申请人独家拥有,实验证实该细胞可作为抗菌肽的真核表达工具;经证实,抗菌肽attacin在该细胞中的表达这一技术发明是首例;其特征在于:以家蝇抗菌肽attacin为目标基因,全基因合成家蝇抗菌肽attacin克隆入PUC57质粒,重组质粒经双酶切后连接到pFastBacTMHTA供体质粒,将制备重组杆状病毒Bacmid?DNA(Bacmid?pFastBacTM?attacin)转染自行建立的家蝇胚胎细胞系MDEC?07114,构建抗菌肽attacin的家蝇胚胎细胞真核表达系统,表达产物经SDS?PAGE和Western?Blot检测,证实抗菌肽attacin在家蝇胚胎细胞表达成功,表达产物具有抗菌活性。
公开号  105274143A
公开日  2016-01-27
专利代理机构  遵义市遵科专利事务所 52102
代理人  刘学诗
颁证日  
优先权  
国际申请  
国际公布  
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