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一种组织工程角膜的制备方法
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Preparation method of tissue engineering cornea

申请号:201510453581.9 申请日:2015-07-29
摘要:本发明属于组织工程技术领域,提供了一种组织工程角膜的制备方法,采用人角膜缘细胞复合动物源性角膜制备的支架材料的方式,将前弹力层、基质层和后弹力层分离,涂布人角膜缘细胞制备的细胞混悬液,后通过交联,粘合等方式完成含细胞的组织工程角膜构建,此方法制备的组织工程角膜在使用方面具有组织相容性高,可以产业化制备等优点。同时所采用细胞未经过体外扩增培养,细胞性状稳定,不易分化,保证了组织工程角膜的安全性。
Abstract: The invention belongs to the technical field of tissue engineering and provides a preparation method of a tissue engineering cornea. A support material prepared from human corneal limbal cell compound animal source cornea is adopted, a bowman membrane, a substrate layer and a descemet membrane are separated and are coated with cell suspension prepared from human corneal limbal cells, and then crosslinking and bonding are carried out, so that construction of a cell-containing tissue engineering cornea is completed, and the tissue engineering cornea prepared by adopting the preparation method has the advantages of high tissue compatibility and industrialization; besides, the adopted cells are not subjected to in-vitro multiplication culture, cell characters are stable, differentiation is hardly caused, and the safety of the tissue engineering cornea is guaranteed.
申请人: 陕西博与再生医学有限公司
Applicant: SHAANXI BOYU REGENERATIVE MEDICINE CO LTD
地址: 710024 陕西省西安市雁塔区********(隐藏)
发明(设计)人: 张蓉
Inventor: ZHANG RONG
主分类号: A61L27/38(2006.01)I
分类号: A61L27/38(2006.01)I A61L27/36(2006.01)I
  • 法律状态
2018-05-08  专利权人的姓名或者名称、地址的变更IPC(主分类):C12N 5/071变更事项:专利权人变更前:东莞博与再生医学有限公司变更后:广东博与再生医学有限公司变更事项:地址变更前:523808 广东省东莞市松山湖高新技术产业开发区台湾高科技园桃园路1号莞台生物技术合作中心1栋1楼05室变更后:523808 广东省东莞市松山湖高新技术产业开发区台湾高科技园桃园路1号莞台生物技术合作中心1栋1楼05室
2017-12-08  授权
2017-01-11  著录事项变更 IPC(主分类):A61L 27/38变更事项:申请人变更前:陕西博与再生医学有限公司变更后:东莞博与再生医学有限公司变更事项:地址变更前:710024 陕西省西安市雁塔区南二环青龙小区伟业都市远景1幢11003号03室变更后:523808 广东省东莞市松山湖高新技术产业开发区台湾高科技园桃园路1号莞台生物技术合作中心1栋1楼05室
2015-11-11  实质审查的生效IPC(主分类):A61L 27/38申请日:20150729
2015-10-14  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  一种组织工程角膜的制备方法,其特征在于,包括以下步骤,????步骤一、动物源性角膜的选取和前处理:选取包含有前弹力层的动物源性角膜,将其置于添加抗生素的、温度在2~30℃的去离子水中浸泡8~24h,待所述动物源性角膜厚度溶胀到2~5倍厚度后,该动物源性角膜的上皮细胞层会由于后弹力层胀起而脱落,同时抗生素的使用,可以有效去除该动物源性角膜组织的细菌,获得无菌的、去除了上皮细胞层的动物源性角膜组织材料;步骤二、角膜各层的分离:将步骤一制备所得的动物源性角膜组织材料置于角膜切削设备中,切削获得前弹力层组织片、基质层组织片和后弹力层组织片,实现角膜各层的分离;?步骤三、将步骤二制备所获得的前弹力层组织片、基质层组织片和后弹力层组织片去抗原、病毒灭活处理后,采用质量百分比浓度为60%~95%的甘油对去抗原、病毒灭活处理后的前弹力层组织片、基质层组织片和后弹力层组织片进行脱水处理,然后在2~30℃的温度条件下,使前弹力层组织片、基质层组织片和后弹力层组织片恢复至溶胀前的生理状态,同时置于所述甘油中保持待用;?步骤四、制备细胞混悬液:将人角膜缘组织置于25~37℃预热的胰酶溶液中消化细胞,胰酶浓度为0.1%~0.25%,消化时间为1~10min,后采用人血清终止消化,800~1200rpm离心收集细胞,随后采用溶液A将收集的细胞制备成细胞混悬液,待用。
公开号  104971384A
公开日  2015-10-14
专利代理机构  
代理人  
颁证日  
优先权  
 
国别 优先权号 优先权日 类型
CN  201510453581  20150729 
国际申请  
国际公布  
进入国家日期  
  • 专利对比文献
类型 阶段 文献号 公开日期 涉及权利要求项 相关页数
SEA  CN1473551A  20040211  假定评述的权利要求1、3-10  说明书第4页第3段至第5页第2段、权利要求5 
SEA  JP2006204527A  20060810  1-10  全文 
SEA  CN101985051A  20110316  1-10  全文 
SEA  CN103550826A  20140205  1-10  全文 
SEA  CN103908700A  20140709  假定评述的权利要求1、3-10  说明书第[0008]-[0019]段 
注:不保证该信息的有效性、完整性、准确性,以上信息也不具有任何效力,仅供参考。使用前请另行委托专业机构进一步查核,使用该信息的一切后果由用户自行负责。
X:单独影响权利要求的新颖性或创造性的文件;
Y:与检索报告中其他 Y类文件组合后影响权利要求的创造性的文件;
A:背景技术文件,即反映权利要求的部分技术特征或者有关的现有技术的文件;
R:任何单位或个人在申请日向专利局提交的、属于同样的发明创造的专利或专利申请文件;
P:中间文件,其公开日在申请的申请日与所要求的优先权日之间的文件,或会导致需核实该申请优先权的文件;
E:单独影响权利要求新颖性的抵触申请文件。
  • 期刊对比文献
类型 阶段 期刊文摘名称 作者 标题 涉及权利要求项 相关页数
  • 书籍对比文献
类型 阶段 书名 作者 标题 涉及权利要求项 相关页数
  • 附加信息
同族专利
CN104971384B
 
引用文献
JP2006204527ACN101985051ACN103550826A
CN103908700ACN1473551A
 
被引用文献
CN106267351ACN106955372A