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一种加速聚合酶螺旋反应的方法及其应用
无权-驳回

Method for accelerating spiral reaction of polymerase and application of method

申请号:201510395143.1 申请日:2015-07-07
摘要:本发明公开了一种加速聚合酶螺旋反应的方法及其应用。本发明提供了用于扩增靶序列的聚合酶螺旋反应的引物,包括特异引物和n个加速引物A;所述特异引物由正向引物FP和反向引物BP组成,所述正向引物FP从5’端至3’端依次由N区域和F区域组成,F区域与靶序列上靠近3’端的Fc区域相同或互补;N区域为不与F区域形成发夹结构的DNA片段;所述反向引物FP从5’端至3’端依次由B区域和所述正向引物FP中的N区域组成,B区域与靶序列上靠近5’端的Bc区域相同或互补;本发明的实验证明,本发明具有以下优点:在添加了加速引物后可以使反应时间大大缩短。
Abstract: The invention discloses a method for accelerating the spiral reaction of polymerase and an application of the method. The invention provides primers for the spiral reaction of polymerase for amplifying a target sequence, wherein the primers comprise a specific primer pair, and n acceleration prime pairs A; the specific primer pair is composed of a forward primer FP and a backward primer BP, the forward primer FP is sequentially composed of a region N and a region F from the terminal 5' to the terminal 3', and the region F is the same as or complementary to a region Fc, close to the terminal 3', on the target sequence; the region N is a DNA fragment not forming a hairpin structure with the region F; the backward primer BP is sequentially composed of a region B and the region N in the forward primer FP from the terminal 5' to the terminal 3', and the region B is the same as or complementary to an region Bc, close to the terminal 5', on the target sequence. Proved by an experiment, the method and the application thereof have the advantages that the reaction time is greatly shortened after addition of the acceleration primers.
申请人: 中国人民解放军疾病预防控制所 北京安洁优科技有限公司
Applicant: INST DISEASE CONTROL & PREVENTION PLA; BEIJING ANJIEYOU TECHNOLOGY CO LTD
地址: 100071 北京市丰台区东大街********(隐藏)
发明(设计)人: 黄留玉 刘威 董德荣 邹大阳 杨展 黄思妺 刘宁伟 徐雅晴 唐玥 马文
Inventor: HUANG LIUYU; LIU WEI; DONG DERONG; ZOU DAYANG; YANG ZHAN; HUANG SIMO; LIU NINGWEI; XU YAQING; TANG YUE; MA WEN
主分类号: C12N15/11(2006.01)I
分类号: C12N15/11(2006.01)I C12N15/10(2006.01)I C12Q1/68(2006.01)I
  • 法律状态
2018-05-15  发明专利申请公布后的驳回IPC(主分类):C12N 15/11申请公布日:20151014
2015-11-18  实质审查的生效IPC(主分类):C12N 15/11申请日:20150707
2015-10-14  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  用于扩增靶序列的聚合酶螺旋反应恒温扩增核酸的引物,包括特异引物对和p对加速引物对A;所述特异引物对由引物FP和引物BP组成,将所述特异引物的靶序列命名为靶序列甲;所述引物FP从5’端至3’端依次由N区域和F区域组成,所述F区域与所述靶序列甲3’末端起15?30bp核苷酸相同或互补;所述引物BP从5’端至3’端依次由N’区域和B区域组成,所述B区域与所述靶序列甲5’末端起15?30bp核苷酸互补或相同;所述N’区域为N区域的反向不互补序列;每个所述加速引物对A的靶序列为所述靶序列甲中的某个区段,将其命名为靶区段乙,且每对加速引物对A中的上游引物和下游引物均不与所述F区域或所述B区域重叠,p为大于等于1的整数。
公开号  104975013A
公开日  2015-10-14
专利代理机构  北京纪凯知识产权代理有限公司 11245
代理人  关畅 白艳
颁证日  
优先权  
 
国别 优先权号 优先权日 类型
CN  201510395143  20150707 
国际申请  
国际公布  
进入国家日期  
  • 专利对比文献
类型 阶段 文献号 公开日期 涉及权利要求项 相关页数
SEA  CN102260733A  20111130  1-10  权利要求1-2,7,9 
SEA  CN104232622A  20141224  1-10  权利要求2,5-7及说明书表2,序列1-3,实施例1 
注:不保证该信息的有效性、完整性、准确性,以上信息也不具有任何效力,仅供参考。使用前请另行委托专业机构进一步查核,使用该信息的一切后果由用户自行负责。
X:单独影响权利要求的新颖性或创造性的文件;
Y:与检索报告中其他 Y类文件组合后影响权利要求的创造性的文件;
A:背景技术文件,即反映权利要求的部分技术特征或者有关的现有技术的文件;
R:任何单位或个人在申请日向专利局提交的、属于同样的发明创造的专利或专利申请文件;
P:中间文件,其公开日在申请的申请日与所要求的优先权日之间的文件,或会导致需核实该申请优先权的文件;
E:单独影响权利要求新颖性的抵触申请文件。
  • 期刊对比文献
类型 阶段 期刊文摘名称 作者 标题 涉及权利要求项 相关页数
  • 书籍对比文献
类型 阶段 书名 作者 标题 涉及权利要求项 相关页数
SEA    萨姆布鲁克等    1-10  第609页 
萨姆布鲁克等: "《分子克隆实验指南(第三版)》", 31 August 2002, 科学出版社 
SEA    曾佑炜等    1-10  第40-41页 
曾佑炜等: "《基因工程技术》", 31 July 2010, 中国轻工业出版社 
SEA    刘云国等    1-10  第75页 
刘云国等: "《水产生物DNA分子标记技术》", 30 April 2009, 科学出版社 
  • 附加信息
同族专利
 
引用文献
CN102260733ACN104232622A
 
被引用文献
CN105219874A