一种以壳寡糖为佐剂的鸭疫里默氏菌菌影疫苗
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riemerella anatipestifer bacterial ghost vaccine adopting chitosan oligosaccharide as adjuvant

申请号：201510238788.4 申请日：2015-05-13

	摘要：本发明的目的在于提供了一种装载具有干扰素诱导活性的聚肌胞苷酸，并加入壳寡糖作为佐剂的鸭疫里默氏菌菌影疫苗。该方案首先构建温控表达载体，电转化入鸭疫里默氏菌原生质体，筛选阳性克隆后28℃增菌培养，然后42℃诱导裂解基因的表达，待OD600不再降低时，加入聚赖氨酸继续作用以充分裂解活菌，然后离心分离菌体。将干燥菌体与6mg/mL的聚肌胞溶液等比例混合，使聚肌胞包埋进入菌影内，然后加入2%壳寡糖水溶液搅拌形成均一的混合物，分装于西林瓶，冷冻干燥，即得到鸭疫里默氏菌新型菌影疫苗。本发明所制备的菌影疫苗经饮水免疫，既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫，也可以激发体液免疫，对机体的保护效果与注射免疫无明显差异。
	Abstract： The purpose of the present invention is to provide a riemerella anatipestifer bacterial ghost vaccine loaded with polyinosinic acid-polycytidylic acid having interferon inducing activity and added with chitosan oligosaccharide as an adjuvant. According to the technical scheme, a temperature control expression vector is constructed and is electrotransformed into riemerella anatipestifer protoplast, positive clones are screened and then are subjected to bacterial amplification culture at a temperature of 28 DEG C, lysis gene expression is induced at a temperature of 42 DEG C, polylysine is added to continuously act when the OD600 is no longer be reduced so as to completely lyze the live bacteria, centrifugation is performed to separate the bacteria, the dried bacteria and a 6 mg/mL Poly I:C solution according to an equal ratio so as to make the Poly I:C be embedded into the bacterial ghosts, a 2% chitosan oligosaccharide aqueous solution is added, stirring is performed to form a uniform mixture, sub-packaging is performed into penicillin bottles, and freeze-drying is performed so as to obtain the novel riemerella anatipestifer bacterial ghost vaccine. According to the present invention, the prepared riemerella anatipestifer bacterial ghost vaccine is immunized through drinking water, such that the local immunity on the respiratory tract mucous membrane and the digestive tract mucous membrane can be irritated, the humoral immunity can be stimulated, and the protection effect on the human body is not different from the injection immunity.
	申请人：青岛农业大学
	Applicant： UNIV QINGDAO AGRICULTURAL
	地址： 266109 山东省青岛市城阳区********(隐藏)
	发明(设计)人：刘文华刘宗柱任慧英王晓雷张灿
	Inventor： REN HUI-YING; WANG XIAO-LEI; ZHANG CAN; LIU WEN-HUA; LIU ZONG-ZHU
	主分类号： A61K39/02(2006.01)I
	分类号： A61K39/02(2006.01)I A61K39/39(2006.01)I C12N1/21(2006.01)I C12N15/74(2006.01)I A61P31/04(2006.01)I

法律状态

2018-11-27	授权

2015-11-18	实质审查的生效IPC(主分类):A61K 39/02申请日:20150513

2015-10-14	公开

注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。

其他信息

主权项

一种制备鸭疫里默氏菌菌影疫苗的方法，其特征在于：利用噬菌体PhiX174的E基因（简称E）与葡萄球菌核酸酶A基因（简称SN）构建温控双裂解基因pBV?E?SN，将其电转化鸭疫里默氏菌原生质体，筛选得到阳性克隆。

公开号

104971346A

公开日

2015-10-14

专利代理机构

代理人

颁证日

优先权

国别	优先权号	优先权日	类型

CN	201510238788	20150513	Y

国际申请

国际公布

进入国家日期

专利对比文献

类型	阶段	文献号	公开日期	涉及权利要求项	相关页数

Y	SEA	CN101934072A	20110105	1-7	权利要求1-4

Y	SEA	CN103146732A	20130612	1-7	摘要和权利要求1-9

注：不保证该信息的有效性、完整性、准确性，以上信息也不具有任何效力，仅供参考。使用前请另行委托专业机构进一步查核，使用该信息的一切后果由用户自行负责。

Ｘ：单独影响权利要求的新颖性或创造性的文件；
Ｙ：与检索报告中其他Ｙ类文件组合后影响权利要求的创造性的文件；
Ａ：背景技术文件，即反映权利要求的部分技术特征或者有关的现有技术的文件；
Ｒ：任何单位或个人在申请日向专利局提交的、属于同样的发明创造的专利或专利申请文件；
Ｐ：中间文件，其公开日在申请的申请日与所要求的优先权日之间的文件，或会导致需核实该申请优先权的文件；
Ｅ：单独影响权利要求新颖性的抵触申请文件。

期刊对比文献

类型	阶段	期刊文摘名称	作者	标题	涉及权利要求项	相关页数

Y	SEA	《中国优秀硕士学位论文全文数据库农业科技辑》	王勇	鸭疫里默氏杆菌菌蜕技术的初步研究	1-7	D050-262

王勇: "鸭疫里默氏杆菌菌蜕技术的初步研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库农业科技辑》