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芦荟胶囊在益生菌发酵产品中的应用
无权-驳回

申请号:201510234567.X 申请日:2015-06-09
摘要:一种芦荟胶囊在益生菌发酵产品中的应用,其特征是利用库拉索芦荟原汁与植物乳酸杆菌ATCC?8014共发酵,将益生菌芦荟共发酵的产品冻干成粉末或颗粒状,以胶囊的形式包裹,提高产品贮藏期限,降低产品口服时的效用损失,实现产品的最优。在前期实验基础上,经确定其最佳发酵条件后,针对益生菌芦荟发酵液的性质进行了测定,包括抗氧化性检测、抗菌能力和抗炎症能力检测。
申请人: 南昌大学
地址: 330031 江西省南昌市红谷滩新区学府大道999号
发明(设计)人: 陈廷涛 王鑫 辛洪波
主分类号: A23L1/29(2006.01)I
分类号: A23L1/29(2006.01)I A23P1/04(2006.01)I A23L1/03(2006.01)I G01N21/31(2006.01)I G01N1/28(2006.01)I G01N1/38(2006.01)I
  • 法律状态
2017-07-07  发明专利申请公布后的驳回 IPC(主分类):A23L 1/29申请公布日:20150826
2015-09-23  实质审查的生效IPC(主分类):A23L 1/29申请日:20150609
2015-08-26  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  一种芦荟胶囊在益生菌发酵产品中的应用,其特征是:(1)芦荟的选择和制备:采选芦荟叶片,剔除带有病斑、软腐的叶片,叶片均重300~400?g;叶片采用75%?酒精进行表面消毒,去除芦荟叶表面皮层,采用榨汁机榨汁,分装后,在离心速度6000?rpm/min下离心10?min,再次分装,制成芦荟原汁;(2)采用巴氏消毒法将芦荟原汁灭菌,在55?℃下处理30?min,在4?℃下保存备用;(3)植物乳酸杆菌ATCC?8014的活化A)从?80?℃冰箱取出植物乳酸杆菌ATCC?8014,接种于5?mL?MRS培养基中,在37?℃下恒温培养箱中培养过夜;B)取过夜培养的植物乳酸杆菌ATCC?8014,按1%接种5?mL培养基中,二次活化;(4)发酵:选用二次活化后的植物乳酸杆菌ATCC?8014,按5%接种量添加到芦荟原汁中,并辅以10%脱脂乳和2%葡萄糖,在37?℃下发酵48h;A)发酵后处理:发酵完毕,分装发酵液,采用冻干机冻干成粉末状;B)胶囊的制备:选择海藻酸钠为囊材,以果胶为辅材,胶液总浓度为2%,胶液与菌液体积比为1:1,海藻酸钠与果胶质量比为2:1,CaCL2浓度为0.3?moL/L;C)采用制备完成的胶囊包裹冻干后的发酵液粉末,制备芦荟胶囊;(5)芦荟发酵液抗氧化性指标的测定?A)DPPH自由基清除能力的测定?取2ml芦荟发酵液,加入2ml?DPPH乙醇溶液,黑暗下室温反应30min,然后用等体积的三氯甲烷抽提,取上清517nm测OD,对照为去离子水加DPPH溶液;B)羟基自由基清除能力的测定?取2?mmol/L的硫酸亚铁溶液1?mL,?6?mmol/L过氧化氢1?mL,?6?mmol/L水杨酸1?mL,?并加入芦荟发酵液1?mL,静置?30?min,以蒸馏水为参比,在510?nm处测定吸光度,计算羟自由基的清除率;?????C)3,5?二硝基水杨酸法测定还原糖;?????a、标准曲线的制作:取8支15?mm×180?mm试管,分别编号为0至7,向其中依次加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.4、1.6、2.0?mL的1?mg/mL的葡萄糖标准溶液,然后用蒸馏水定容到2?mL?再依次加入1.5?mL水杨酸,水浴5?min,取出立即冷却到室温,加21.5?mL蒸馏水,摇匀,在540?nm处测定吸光度;?????b、样品中还原糖含量的测定:以标准曲线制作中0号为对照,向15?mm×180?mm试管中加入1?mL样品溶液,1?mL蒸馏水和1.5?mL水杨酸,水浴5?min,取出立即冷却到室温,加21.5?mL蒸馏水,摇匀,在540?nm处测定吸光度;c、对Fe2+的螯合能力的测定取0.5?mL芦荟发酵液中加入0.4%的FeSO4溶液0.1?mL混合均匀后,再加入0.1?mL?1%的抗坏血酸溶液和0.2?mol/L氢氧化钠溶液1?mL,37℃下反应20?min,然后用10%的三氯乙酸去除蛋白6000?rpm,10?min,4℃,取0.4?mL上清并加入4?mL?0.1%邻二氮菲,室温反应10?min,测定536?nm处吸光度;d、总还原力的测定取1?mL的样品,加入?1?mL的磷酸缓冲液p?H=6.6和1%铁氰化钾溶液1?mL,混匀,?在?50?℃下保温?20?min,?加入?10?%的三氯乙酸溶液1?mL,振荡混匀后取1?mL的混合液,?加入4?mL去离子水和?0.1?%的三氯化铁溶液0.4?mL?,?静置10?min,用去离子水为空白,?在700?nm下进行比色,吸光度的值越大,说明还原力越强;(6)抑菌试验???A)活化鼠伤寒、肠炎沙门、志贺301、福氏志贺、单增ATCC、金黄色葡萄球菌cowan1、大肠O157、痤疮丙酸杆菌,过夜培养;B)将8株致病菌的菌体浓度调至108?CFU/mL左右,分别取100?μL菌液涂布于LB平板;C)待菌液吹干后,在平板中小心放入无菌的牛津杯;将发酵液上清10000?rpm/min离心10?min,向牛津杯中加入发酵液上清;D)37℃培养6?8?h,每隔2~3?h观察;E)测量平板中的抑菌圈直径,并照相;(7)白介素?1β抗炎症因子检测?A)?收集生长状态较好对数生长期的RAW264.7细胞,调整细胞悬液浓度,接种到六孔板中,每孔加入2mL,铺板使待测细胞调密度105cell/孔,(边缘孔用无菌PBS填充)??B)在5%?CO2,37?℃培养箱孵育过夜,细胞铺满六孔板底后可加药处理,加LPS(1mg/mL)?2uL培养1h后,加入芦荟大黄素2.5μg/mL,?芦荟大黄素10μg/mL,?芦荟多糖2.5μg/mL,?芦荟多糖15μg/mL,?芦荟原汁5μg/mL,?芦荟原汁50μg/mL,?发酵液5μg/mL,?发酵液50μg/mL,?继续培养12h;??C)?取各处理组细胞上清进行ELISA检测。
公开号  104856021A
公开日  2015-08-26
专利代理机构  南昌市平凡知识产权代理事务所 36122
代理人  夏材祥
颁证日  
优先权  
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