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一种快速高通量检测细菌文库质粒大小的方法
审中-实审

申请号:201410351775.3 申请日:2014-07-23
摘要:本发明公开了一种快速高通量检测细菌文库质粒大小的方法,该方法为经过4步不同的处理:菌体悬浮,菌体裂解、除蛋白、跑DNA凝胶电泳,不需要抽提质粒,也不必做PCR,2个小时内即可出结果,获得细菌文库中重组质粒的大小。该方法快速可靠,操作简单,节约成本,重复性好,实现高通量筛选,尤其适合于经常从事大规模的克隆工作使用,具有较好的应用价值。
申请人: 武汉百杜生物科技有限公司
地址: 430000 湖北省武汉市东湖高新技术开发区雄楚大街908号金地中心城
发明(设计)人: 刘晓艳 傅克承 付克平 张薇 程猛
主分类号: C12Q1/68(2006.01)I
分类号: C12Q1/68(2006.01)I
  • 法律状态
2016-02-24  实质审查的生效IPC(主分类):C12Q 1/68申请日:20140723
2016-01-27  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  一种快速高通量检测细菌文库质粒大小的方法,具体步骤下:1)菌体悬浮,利用溶液I在离心管中进行菌体悬浮;溶液I的配方对于革兰氏阴性菌是25mM?Tris?HCl,25mM?EDTA,0.02%m/v溴酚兰;对于革兰氏阳性菌是0.2%m/v溶菌酶,25mM?Tris?HCl,25mM?EDTA,0.02%m/v溴酚兰;2)菌体裂解,在步骤1)的离心管中加入溶液II,溶液II的配方是0.3M?NaOH,2%m/vSDS混匀后置于70℃水浴锅中水浴15分钟;3)除蛋白,在步骤2)的离心管中加入溶液III,混匀后,12000?rpm离心10分钟,溶液III的配方是苯酚:氯仿:异戊醇按照体积比25:24:1进行配制;4)进行DNA凝胶电泳,取步骤3)中的离心上清液直接点样进行0.8%的DNA凝胶电泳即可判断重组质粒插入片段的大小。
公开号  105274191A
公开日  2016-01-27
专利代理机构  武汉宇晨专利事务所 42001
代理人  王敏锋
颁证日  
优先权  
国际申请  
国际公布  
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