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铁皮石斛的种子组培繁殖方法
无权-视为撤回

申请号:201310282961.1 申请日:2013-07-08
摘要:铁皮石斛的种子组培繁殖方法,属于中药材种植技术领域,包括引种灭菌、诱导培养、分化培养、壮苗和生根培养四大步骤;其有益效果是采用种子组培所得到的幼苗,不易退化,遗传形状稳定,有效物质含量与野生品种相近,保证了种子的质量;铁皮石斛的种子数量大,可以大大增加种子的繁殖数量;同时本发明方法还大大缩短了铁皮石斛的组培繁殖周期,从剪切种子到生根苗的组培周期仅需4~5个月,大大缩短了生产时间,降低了生产成本。
申请人: 重庆市秀山红星中药材开发有限公司
地址: 409900 重庆市秀山土家族苗族自治县秀山县乌杨街道园区路21号
发明(设计)人: 杨再江 刘湘凤 顾君 龚成珍 祝利
主分类号: A01H4/00(2006.01)I
分类号: A01H4/00(2006.01)I
  • 法律状态
2017-03-08  发明专利申请公布后的视为撤回 IPC(主分类):A01H 4/00申请公布日:20130925
2013-09-25  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  铁皮石斛的种子组培繁殖方法,包括引种灭菌、诱导培养、分化培养、壮苗和生根培养四大步骤,其特征在于具体方法如下:⑴引种灭菌:选取未开裂的野生铁皮石斛成熟果实,在流水下冲洗,放入1%洗洁精水溶液中搅拌5~8min,再用无菌水冲洗10~12min;在超净工作台上将果实放在70%的酒精中消毒20秒,再用0.1%的HgCl2水溶液浸泡7~9min,然后用无菌水冲洗5~6次;⑵诱导培养:将消毒处理后的果实在无菌环境中切开表皮,将果实切成0.1mm的方块,放入无菌水中摇晃,振荡均匀后用药勺接种在诱导培养基上,每瓶接种3~5块,在夜温22℃,日温24℃,相对湿度68%~70%,无光照的条件下进行种子诱导培养,15~20天后,种子开始萌动膨大;继续培养10天后,可以看到疏松状的原球茎雏形;此时将原球茎转入到促形培养基中,在夜温23℃,日温25℃,相对湿度70%~72%,光照强度1600lx,每天光照开始时间上午7:00,每天光照时长14小时的条件下进行种子萌发的原球茎促形培养,25~30天后,疏松状的原球茎雏形表面逐渐形成凹凸不平的颗粒物,随着培养时间的延长,颗粒物长大形成直径1~2mm的原球茎颗粒物;⑶分化培养:将生长状态良好的原球茎转接到分化培养基上,每瓶接种45~50颗,在夜温25℃,日温27℃,相对湿度73%~77%,光照强度1800lx,每天光照开始时间上午7:00,每天光照时长12小时的条件下进行分化培养,在20~25天之内可观察到原球茎开始分化出芽点,然后将温度调整为夜温26℃,日温28℃,在第35~40天之内,可观察到原球茎长出小芽并开始分叶,到第50天可看到增殖芽长高1~1.5cm并带有2~3片小叶,得到分化苗;⑷壮苗及生根培养:将分化培养后的株高1~2cm、带有2~3片叶的试管苗接种于生根培养基上,每瓶接种10~15株,在夜温26℃,日温28℃,相对湿度73%~77%,光照强度2000lx,每天光照开始时间上午7:00,每天光照时长12小时的条件下进行生根培养,在第20~25天之内,基部开始出现2~3条约1cm长的白色根,每株苗有3~5条根,随后逐渐生长,到在第35~40天之内,生根率达到90%以上,根须长度1.5cm~2.0cm,苗高3~5cm,即得到铁皮石斛的生根苗,这时可进行炼苗,移栽;上述组培繁殖方法中,所提到的各阶段培养基的配方是:诱导培养基:N6 +NAA0.18mg/L+20%椰乳+2%蔗糖+活性炭200mg/L;pH=5.8;促形培养基:N6 +NAA0.25mg/L+20%椰乳+2%蔗糖+活性炭200mg/L;pH=5.8;分化培养基:N6+6~BA0.53mg/L+NAA0.20mg/L+10%香蕉汁+2%蔗糖+活性炭200mg/L;pH=5.8;生根培养基:N6+IBA0.5mg/L+10%香蕉汁+2%蔗糖+活性炭200mg/L;pH=5.6。
公开号  103314858A
公开日  2013-09-25
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