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一种采用高效液相色谱法快速检测水体中大肠杆菌浓度的方法
无权-未缴年费

申请号:201310281931.9 申请日:2013-07-05
摘要:本发明公开了一种采用高效液相色谱法快速检测水体中大肠杆菌浓度的方法,包括以下步骤:1)获得多份不同已知浓度的大肠杆菌溶液;2)按以下色谱条件确定大肠杆菌与2,5-二羟基苯甲酸在高效液相色谱仪上响应值的依从关系为线性关系,其中色谱柱:C18色谱柱;流动相:由体积比为10~20∶90~80的A液和B液组成,其中A液为乙腈,B液为0.03~0.07%体积的磷酸水溶液,洗脱时为等度洗脱;检测波长:205~235nm;3)将待测水体样品进样,将响应的2,5-二羟基苯甲酸浓度值利用已有的线性关系曲线,读出待测水体的大肠杆菌浓度。本发明所述方法操作简单,检测仅需3小时;检测限可达10000cfu/mL。
申请人: 桂林市产品质量监督检验所
地址: 541004 广西壮族自治区桂林********(隐藏)
发明(设计)人: 吕保樱 农彦贤 唐艳平
主分类号: G01N30/02(2006.01)I
分类号: G01N30/02(2006.01)I G01N30/06(2006.01)I
  • 法律状态
2017-08-18  未缴年费专利权终止 IPC(主分类):G01N 30/02申请日:20130705授权公告日:20140618终止日期:20160705
2014-06-18  授权
2013-10-30  实质审查的生效IPC(主分类):G01N 30/02申请日:20130705
2013-09-25  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  一种采用高效液相色谱法快速检测水体中大肠杆菌浓度的方法,其特征在于包括以下步骤:1)获得多份不同已知浓度的大肠杆菌溶液;2)确定大肠杆菌与高效液相色谱方法的依从关系2.1)确定高效液相色谱条件:色谱柱:C18色谱柱;流动相:由体积比为10~20∶90~80的A液和B液组成,其中A液为乙腈,B液为0.03~0.07%体积的磷酸水溶液,洗脱时为等度洗脱;检测波长:205~235nm;2.2)确定大肠杆菌与2,5‑二羟基苯甲酸在高效液相色谱仪上响应值的依从关系:将步骤1)获得的各份大肠杆菌溶液调配成浓度大于5×104cfu/mL的菌液,然后分别向各份菌液中按同样的比例加入营养液,培养2~4h,得到培养后菌液;所述的营养液由水杨酸与葡萄糖或果糖用无菌水配制而成,其中水杨酸的浓度为1×10‑4~9×10‑4mol/L,葡萄糖或果糖的浓度为1×10‑3~9×10‑2mol/L;采用高效液相色谱仪,按上述确定的色谱条件,将所得的各份培养后菌液逐一进样,记录每次进样时高效液相色谱仪上响应的2,5‑二羟基苯甲酸的浓度值,根据全部进样的大肠杆菌浓度和与其对应2,5‑二羟基苯甲酸的响应浓度值作曲线,得到2,5‑二羟基苯甲酸浓度‑大肠杆菌浓度曲线,该曲线为一直线,确定大肠杆菌与2,5‑二羟基苯甲酸在高效液相色谱仪上的响应浓度的依从关系为线性关系;3)大肠杆菌浓度的快速检测3.1)按步骤2)中的检测条件,将待测水体样品进样,记录高效液相色谱仪上响应的2,5‑二羟基苯甲酸浓度值;3.2)利用步骤2.2)确定的2,5‑二羟基苯甲酸浓度‑大肠杆菌浓度曲线,结合上述步骤3.1)记录的浓度值读出该浓度值对应的大肠杆菌浓度,该浓度即为待测水体的大肠杆菌浓度。
公开号  103323556A
公开日  2013-09-25
专利代理机构  桂林市持衡专利商标事务所有限公司 45107
代理人  唐智芳
颁证日  
优先权  
国际申请  
国际公布  
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