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一种采用磁珠从样品中提取并纯化核酸的方法
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申请号:200910307632.1 申请日:2009-09-24
摘要:一种采用磁珠从样品中提取并纯化核酸的方法,其包括以下步骤:(1)磁珠处理:以肽-寡核苷酸修饰磁珠;(2)细胞裂解:将含有靶核酸的待分离样品加入离心管中,再加入裂解液裂解细胞;(3)核酸吸附:向溶液中加入经肽-寡核苷酸修饰的磁珠,核酸被磁珠表面吸附;将离心管置于磁性分离器,磁珠吸附于试管壁;(4)去除杂质:加入水相缓冲液,对表面吸附有核酸并附着于试管壁的磁珠进行洗涤,将磁珠上的其他杂质冲洗分离;(5)核酸回收:吸附在磁珠表面的核酸直接作为PCR扩增的模板,或者加入洗脱缓冲液,使吸附在磁珠表面的核酸分子释放进入缓冲液,用于下游实验。本发明方法所用磁珠可置于4℃或-20℃保存,且运输方便,吸附效率高,价格较低。使用本发明方法提取并纯化的核酸,应用范围广泛。
申请人: 戴立忠
地址: 410205湖南省长沙市岳麓区桐梓坡西路198号
发明(设计)人: 戴立忠 熊晓燕
主分类号: C12N15/10(2006.01)I
分类号: C12N15/10(2006.01)I C07H21/00(2006.01)I C12Q1/68(2006.01)I C12Q1/70(2006.01)I
  • 法律状态
2017-08-04  专利权质押合同登记的生效 IPC(主分类):C12N 15/10登记号:2017430000042登记生效日:20170711出质人:湖南圣维基因科技有限公司、湖南圣湘生物科技有限公司质权人:宁波保税区特里同股权投资合伙企业(有限合伙)、苏州礼瑞股权投资中心(有限合伙)、宁波梅山保税港区君和同睿股权投资合伙企业(有限合伙)、陈邦发明名称:一种采用磁珠从样品中提取并纯化核酸的方法申请日:20090924授权公告日:20110216
2016-07-27  专利权的转移IPC(主分类):C12N 15/10登记生效日:20160706变更事项:专利权人变更前权利人:湖南圣维基因科技有限公司变更后权利人:湖南圣湘生物科技有限公司变更事项:地址变更前权利人:410012 湖南省长沙高新开发区麓松路680号变更后权利人:410012 湖南省长沙高新技术产业开发区麓松路680号
2014-12-10  专利权的转移
IPC(主分类):C12N 15/10
变更事项:专利权人
变更前权利人:戴立忠
变更后权利人:湖南圣维基因科技有限公司
变更事项:地址
变更前权利人:410205 湖南省长沙市岳麓区桐梓坡西路198号
变更后权利人:410012 湖南省长沙高新开发区麓松路680号
登记生效日:20141119
2011-02-16  授权
2010-04-28  实质审查的生效IPC(主分类):C12N 15/10申请日:20090924
2010-03-10  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  1.一种采用磁珠从样品中提取并纯化核酸的方法,其特征在于,包 括以下步骤: (1)肽寡核苷酸修饰磁珠: 以γFe2O3和Fe3O4磁性材料合成的均一、超顺磁、单发散性多聚微球为磁性来源,每个 微球体包被一层多聚材料,通过乳液聚合或者分散聚合的方法制备携带羧酸盐的磁性高分子 微球;经羧酸盐修饰的多聚材料核心粒子表面覆被一层磁铁,oligo(dT)14再共价结合在 此表面上,核酸分子能够很好的锚定在此寡核苷酸上; (2)细胞裂解:将含有靶核酸的待分离样品加入离心管中,再加入裂解液裂解细胞, 以释放核酸; (3)核酸吸附:向溶液中加入肽寡核苷酸修饰的磁珠,核酸被磁珠表面吸附,蛋白 质以及其他的杂质则不被吸附;将离心管置于磁性分离器,磁珠吸附于试管壁; (4)去除杂质:加入水相缓冲液,对表面吸附有核酸并附着于试管壁的磁珠进行洗涤 ,将磁珠上的杂质冲洗分离; (5)核酸回收:吸附在磁珠表面的核酸直接作为PCR扩增的模板,或者加入洗脱液, 使吸附在磁珠表面的核酸分子解吸,进入洗脱液中,再用于下游实验。
公开号  101665785
公开日  2010-03-10
专利代理机构  长沙星耀专利事务所
代理人  宁星耀
颁证日  
优先权  
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国际公布  
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