搜索 分析 新世界 法规 图书 网址导航 更多
高级用户登录 | 登录 | |

克服三叶草品种基因型障碍高频体胚再生培养方法
无权-未缴年费

申请号:200910034976.X 申请日:2009-09-16
摘要:本发明公开了一种克服三叶草品种基因型障碍高频体胚再生培养方法,包括(1)选材:三叶草成熟种子经冲洗、消毒杀菌、干燥后选取无菌苗的上胚轴、下胚轴和再生植株叶片三种外植体;(2)将上述选取的外植体接种于胚发生愈伤组织诱导培养基上培养;(3)将上述经胚发生愈伤组织诱导培养后的外植体接种于胚继代形成培养基上培养;(4)将上述经胚继代形成培养后的外植体接种于胚成熟萌发成苗培养基上培养形成幼苗;(5)壮苗生根培养;(6)再生植株移栽、成活。本发明可有效地克服三叶草高频体胚再生培养中不同品种及基因型障碍问题,大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率,提高育种效率。
申请人: 江苏农林职业技术学院
地址: 212400江苏省句容市华阳镇长江路3号
发明(设计)人: 梁慧敏 王永平 周道宏 师尚礼 王小春 汤容娣
主分类号: A01H4/00(2006.01)I
分类号: A01H4/00(2006.01)I C05G1/00(2006.01)I
  • 法律状态
2015-11-04  未缴年费专利权终止IPC(主分类):A01H 4/00申请日:20090916授权公告日:20111109终止日期:20140916
2011-11-09  授权
2010-04-28  实质审查的生效IPC(主分类):A01H 4/00申请日:20090916
2010-03-10  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  1、一种克服三叶草品种基因型障碍高频体胚再生培养方法,包括以下步骤: (1)选材:三叶草成熟种子经冲洗、消毒杀菌、干燥后,在幼苗生长驯化 培养基上培养无菌苗,选取萌发后的无菌苗的上胚轴、下胚轴和再生植株叶片 三种外植体; (2)胚发生愈伤组织诱导:将上述选取的外植体接种于胚发生愈伤组织诱 导培养基上,在白天室温27±2℃、夜晚室温20±1℃的条件下暗培养28~30 天; (3)胚继代形成培养:将上述经胚发生愈伤组织诱导培养后的外植体接种 于胚继代形成培养基上,首先进行5天的4~6℃低温人工气候箱暗培养,然后 在白天室温27±2℃、夜晚室温20±1℃的条件下暗培养30-35天; (4)胚成熟萌发成苗培养:将上述经胚继代形成培养后的外植体接种于胚 成熟萌发成苗培养基上,在白天室温27±2℃、夜晚20±1℃、光照强度为1000~ 1500lx的条件下进行14h/d的光培养20~25天,形成幼苗; (5)壮苗生根培养:将上述经胚成熟萌发成苗培养后的幼苗转接到幼苗生 长驯化培养基上进行壮苗生根培养,形成生根的再生植株; (6)生根的再生植株移栽、成活; 所述的幼苗生长驯化培养基为:1/2改良MS+20g/L白糖+0.7%琼脂; 所述的胚发生愈伤组织诱导培养基为:改良SH+8~12mg/L 2,4-D+0.2~ 0.5mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+0.3%phytagel; 所述的胚继代形成培养基为:改良SH+2~8mg/L 2,4-D+0.2~0.5mg/L 6-BA+50g/L蔗糖+0.35%phytagel; 所述的胚成熟萌发成苗培养基为:改良MS+30g/L白糖+0.7%琼脂。
公开号  101663997
公开日  2010-03-10
专利代理机构  南京纵横知识产权代理有限公司
代理人  董建林 严志平
颁证日  
优先权  
国际申请  
国际公布  
进入国家日期