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纳滤浓缩纯化核酸酶P1及生产核苷酸的方法
无权-撤回

Methods for concentrating and purifying nuclease P1 by nanofiltration and producing nucleotide

申请号:200810013419.5 申请日:2008-09-27
摘要:本发明公开一种纳滤浓缩纯化核酸酶P1的方法,是选育高活性的桔青霉菌株M843,在培养基中经液体深层发酵得到核酸酶P1;用离心机除去菌体和培养基的固形物,得含核酸酶P1的上清液;纳滤膜透析除去部分水、无机盐及色素。本发明还公开了用纳滤浓缩纯化核酸酶P1生产核苷酸的方法,是用浓缩纯化核酸酶P1降解核糖核酸;将降解液经过20nm~50nm的陶瓷膜超滤;将超滤液经切割分子量为300道尔顿的纳滤膜透析,除去无机盐、色素等杂物,得到浓缩的5’核苷酸溶液;将所得到浓缩的5’核苷酸溶液经升膜浓缩塔进一步浓缩,使固形物含量为35~45%,喷雾干燥或微波干燥制成5’核苷酸粉状产品。具有工序简单、收率高、成本低、质量稳定、可大规模生产等优点。
Abstract: The invention discloses a method for carrying out nanofiltration, concentration and purification of a nuclease P1, a Penicillium citrinum strain M843 with the high activity is bred, and the nuclease P1 is obtained via the liquid depth fermentation in a culture medium; a centrifuge is used for removing bacteria and solid matters of the culture medium, thereby obtaining supernatant liquid containing the nuclease P1; part of water, inorganic salts and pigments are removed through the dialysis by a nanofiltration membrane. The invention further discloses a method for producing nucleotide by using the nuclease P1 which is prepared by nanofiltration, concentration and purification, the concentrated and purified nuclease P1 is used for degrading ribonucleic acid; degraded solution is carried out the ultrafiltration via a ceramic membrane of 20nm to 50nm; ultrafiltration liquid is dialyzed by the nanofiltration membrane with the molecular weight cutoff of 300 Daltons, thereby removing the inorganic salts, the pigments and other impurities and obtaining concentrated 5' nucleotide solution; the obtained concentrated 5' nucleotide solution is carried out the further concentration by a rising membrane concentrating tower, thereby leading the content of solid matters to be 35 to 45 percent and preparing a 5' nucleotide powder product by spray drying or microwave drying. The method has the advantages of simple procedure, high yield, low cost, stable quality, large-scale production and the like.
申请人: 大连珍奥生物技术股份有限公司
Applicant: DALIAN ZHEN AO BIO TECHNOLOGY[CN]
地址: 116021辽宁省********(隐藏)
发明(设计)人: 乔宾福 俞慧君 霍旭辉
Inventor: BINFU QIAO[CN]; HUIJUN YU[CN]; XUHUI HUO[CN]
主分类号: C12N9/22(2006.01)I
分类号: C12N9/22(2006.01)I C12P19/30(2006.01)I C12R1/80(2006.01)N
  • 法律状态
2009-10-07  发明专利申请公布后的撤回
2009-02-11  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  1.一种纳滤浓缩纯化核酸酶P1的方法,其特征在于按如下步骤进行: a.选育高活性的桔青霉菌株M843,在培养基中经液体深层发酵得到核酸 酶P1; b.用离心机除去菌体和培养基的固形物,得含核酸酶P1的上清液; c.纳滤膜透析除去部分水、无机盐及色素。
公开号  101363016A
公开日  2009-02-11
专利代理机构  大连非凡专利事务所
代理人  闪红霞
颁证日  
优先权  
 
国别 优先权号 优先权日 类型
CN  200810013419  20080927 
国际申请  
国际公布  
进入国家日期  
  • 专利对比文献
类型 阶段 文献号 公开日期 涉及权利要求项 相关页数
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X:单独影响权利要求的新颖性或创造性的文件;
Y:与检索报告中其他 Y类文件组合后影响权利要求的创造性的文件;
A:背景技术文件,即反映权利要求的部分技术特征或者有关的现有技术的文件;
R:任何单位或个人在申请日向专利局提交的、属于同样的发明创造的专利或专利申请文件;
P:中间文件,其公开日在申请的申请日与所要求的优先权日之间的文件,或会导致需核实该申请优先权的文件;
E:单独影响权利要求新颖性的抵触申请文件。
  • 期刊对比文献
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类型 阶段 书名 作者 标题 涉及权利要求项 相关页数
  • 附加信息
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引用文献
 
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