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从原核生物中纯化人乳头瘤病毒晚期蛋白L1的方法
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申请号:200610140613.0 申请日:2006-09-29
摘要:本发明提供了一种从大肠杆菌中纯化人乳头瘤病毒晚期蛋白L1的方法。该方法通过对大肠杆菌菌体裂解上清中的L1蛋白进行无盐沉淀、复溶、离子交换层析、疏水层析和复性可以大规模制备电泳纯度达到98%以上的类病毒颗粒。该类病毒颗粒具有良好的免疫原性,能诱导针对同型HPV病毒的中和抗体,可作为预防HPV感染的疫苗。
申请人: 厦门大学 北京万泰生物药业有限公司
地址: 361005福建省厦门市思明区思明南路422号
发明(设计)人: 李少伟 沈文通 潘晖榕 鲜阳凌 张军 夏宁邵
主分类号: C12N15/09(2006.01)I
分类号: C12N15/09(2006.01)I C12N1/21(2006.01)I C07K1/14(2006.01)I C07K14/025(2006.01)I C12N7/01(2006.01)I A61K39/12(2006.01)I
  • 法律状态
2015-08-19  授权
2008-05-28  实质审查的生效
2008-04-02  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  1.一种纯化乳头瘤病毒(特别是人类乳头瘤病毒)L1蛋白质 的方法,该方法包括如下步骤: (a)获得表达有所述乳头瘤病毒L1蛋白质的原核宿主细胞,例 如大肠杆菌细胞;这可以通过例如将表达有所述乳头瘤病毒L1蛋白质 的原核宿主细胞培养物离心、收集细胞而实现; (b)将所述原核宿主细胞在重悬溶液中重悬,所述重悬溶液含有 足以溶解所述乳头瘤病毒L1蛋白质的浓度的盐,优选还含有缓冲液, 例如Tris缓冲液(例如20mM?Tris缓冲液pH7.2); (c)破碎所述原核宿主细胞;优选通过匀浆器破碎、均质机破碎、 超声波处理、研磨、高压挤压、溶菌酶处理中的一项或者多项方法来 实现; (d)除去不溶性部分,获得菌体裂解上清;优选通过如下方式实 施:离心(例如以足以沉降细菌细胞碎片的离心力进行离心)裂解物, 留取上清液; (e)将菌体裂解上清中盐的浓度降低到所述乳头瘤病毒L1蛋白 质足以被选择性沉淀的盐浓度;和 (f)非必需地收获沉淀,例如通过离心来实现。
公开号  101153280
公开日  2008-04-02
专利代理机构  中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
代理人  罗菊华
颁证日  
优先权  
国际申请  
国际公布  
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