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抗Axin的抗体C8的制备方法
无权-未缴年费

Axin antibody C8 preparation method

申请号:200510072500.7 申请日:2005-05-20
CN200510072500
CN1765927A
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摘要:抗Axin的抗体C8的制备方法,涉及一种抗Axin的抗体C8的制备方法。提供一种效价高、特异性强、能用于进行内源Axin的免疫印迹、免疫沉淀分析的抗Axin的抗体C8制备方法。先用PGR方法扩增出挪威鼠表达Axin 751-832氨基酸序列DNA片段,并连接到原核表达载体pGST parallel中构建重组质粒,再转化到大肠杆菌BL21菌株中,通过IPTG诱导,表达出融合有GST的Axin片断GST-Axin751-832;用谷胱甘肽-琼脂糖树脂纯化该抗原蛋白片断,4次免疫新西兰兔后,采血,纯化抗体血清。能快速大量获得抗原蛋白,抗体纯化方法独特,成本低,过程简单。其抗体效价高,特异性强。能检测到细胞内含量极其稀少的内源Axin。
Abstract: The preparation method for antibody C8 to anti-Axin with high titer, strong specificity, and fit to synthesis for immunoblotting and deposition, which comprises: with PGR method, amplifying the DNA fragment of Norway mouse expressed Axin 751-832 amino acid sequence, linking into pGST parallel to construct recombinant plasmid; then transforming to strain of BL21 of Escherichia coli; with IPTG inducing, expressing GST-Axin751-832 fused with Axin fragment of GST; with glutathion-agarose resin, purifying the albumen fragment; immuning the New Zealand rabbit for four times; gathering blood, purifying antibody serum. This method can obtain mass antibody albumen rapidly with low cost, and the product can detect much less inner Axin.
申请人: 厦门大学
Applicant: UNIV XIAMEN[CN]
地址: 361005福建省********(隐藏)
发明(设计)人: 骆晶晶 贺颖 陈明谅 林圣彩
Inventor: LUO JINGJING HE[CN]
主分类号: C07K16/18(2006.01)I
分类号: C07K16/18(2006.01)I C12N15/70(2006.01)I C12P19/34(2006.01)I
  • 法律状态
2011-07-27  未缴年费专利权终止IPC(主分类):C07K 16/18申请日:20050520授权公告日:20071017终止日期:20100520
2007-10-17  授权
2006-06-28  
2006-05-03  公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
  • 其他信息
主权项  1.抗Axin的抗体C8的制备方法,其特征在于其步骤为:首先用PCR的方法扩增出挪威 鼠编码Axin751-832氨基酸序列的DNA片段,将该片段连接到原核表达载体pGST?parallel 中构建重组质粒,转化到大肠杆菌BL21菌株中,通过IPTG诱导,表达出融合有GST的 Axin片断GST-Axin751-832;然后用谷胱甘肽-琼脂糖树脂纯化该抗原蛋白片断,4次免 疫新西兰兔后,采血,纯化抗体血清,得到抗Axin的多克隆抗体。
公开号  1765927A
公开日  2006-05-03
专利代理机构  厦门南强之路专利事务所
代理人  陈永秀 马应森
颁证日  
优先权  
 
国别 优先权号 优先权日 类型
CN  200510072500  20050520 
国际申请  
国际公布  
进入国家日期  
  • 专利对比文献
类型 阶段 文献号 公开日期 涉及权利要求项 相关页数
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  • 期刊对比文献
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  • 书籍对比文献
类型 阶段 书名 作者 标题 涉及权利要求项 相关页数
  • 附加信息
同族专利
CN100343281C
 
引用文献
CN1422958A
 
被引用文献